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[기술 자료] 정제 요구 사항에 맞는 완벽한 분취용 HPLC 시스템을 구성하기 위한 5가지 주요 질문

작성자최고관리자

등록일2025-06-05

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HPLC 시스템을 구성할 때는 고려해야 할 변수가 많습니다. 도움이 되도록, 꼭 답해야 할 다섯 가지 질문을 소개합니다.

1. 샘플 주입: 샘플 주입은 수동이 좋을까요, 아니면 자동 시료 주입기가 필요한가요?

HPLC 시료는 수동 또는 자동으로 컬럼에 주입됩니다. 처리할 시료가 적으면 수동 시료 주입으로 충분합니다. 더 많은 시료를 처리할 것으로 예상되는 경우에는 자동 시료 주입이 필요합니다. 다양한 용량에 맞는 다양한 시료 주입기가 있습니다.

2. 펌핑 시스템: 어떤 크기의 컬럼이 필요합니까?

컬럼 크기와 정지상 파라미터는 유속 및 압력 요구 사항을 결정하며, 이는 펌핑 시스템 선택에 영향을 미칩니다. 정제할 화합 또는 불순물이 몇 밀리그램일 경우, 컬럼은 최대 30mL/min의 펌프 용량을 수용할 수 있는 30mm 미만의 내경을 갖습니다. 필요한 양이 증가함에 따라, 예를 들어 리드 화합물 최적화를 위해서 컬럼 내경이 최대 50mm까지 증가하면 펌핑 시스템의 유속은 150~200mL/min에 도달할 수 있습니다. 파일럿 규모 및 생산 규모 요건을 갖추려면 이러한 요구가 더욱 커져, 컬럼은 70mm에서 최대 200mm의 내경이 요구되고 최대 2L/min의 유속을 제공합니다.

Binary 펌핑 시스템은 파일럿 규모의 고압 혼합에 적합합니다. 대부분의 시스템은 모듈형으로 구성이 가능하고, 작업 공간을 절약하기 위하여 일체형 HPLC 시스템으로도 구성이 가능합니다. pH나 Salts에 저항력이 강한 응용 분야를 위하여 일반 스테인리스 스틸 재질이 뿐만 아니라 티타늄 재질의 펌프 헤드도 이용 가능합니다.

3. 검출기: 어떤 유형의 검출기가 필요합니까?

자외선-가시광선(UV/vis) 검출기는 정제에 일반적으로 사용되어 분석물질의 기본적인 검출을 제공합니다. 다이오드 어레이 기술이 포함되면 전체 스펙트럼 데이터 수집은 물론 피크 순도 확인 및 스펙트럼 라이브러리 생성이 가능합니다.

증발광산란(ELS) 검출기는 발색단이 포함되지 않은 민감한 시료에 이상적이며, UV 기반 정제 시스템을 보완하는 이상적인 검출기입니다.

질량 분석(MS) 검출기는 표적 질량을 기반으로 분획을 수집하고 표적 화합물의 회수를 보장합니다. 또한 후속 분석 검증이 필요 없으므로 시간을 절약할 수 있습니다. 전도도 검출기는 기울기 형성을 모니터링하며, 올리고뉴클레오타이드 및 생물학적 시료 정제에 특히 중요합니다.

4. 분획 수집(Fraction Collection): 분획을 어떻게 수집할 예정인가요?

모든 정제 과정에는 분획 수집이 필수적이며, 일반적으로 검출기 신호에 의해 분획이 시작됩니다. 적절한 분획 수집기를 선택하는 것은 예상 시료 수와 양에 따라 달라집니다. 랙 세트를 변경하거나, 사용하는 용기를 변경하거나, 분획 수집 장소를 변경하여 분획 용량을 늘릴 수 있습니다. 동일한 액체 처리 플랫폼에서 주입 및 분획 수집 기능을 모두 사용하면 순도 검사를 위해 분획을 재주입하거나, 분획을 모아 정제 후 작업을 가속화할 수 있습니다.

5. 시스템 제어: 시스템을 공유하시겠습니까?

소프트웨어의 사용성과 유연성은 정제 단계를 효과적으로 제어하는 데 매우 중요합니다. 주입기와 분획 수집기를 완벽하게 제어하여 시료 또는 분획 전처리를 용이하게 할 수 있습니다. 조건부 분획 수집은 화합물의 순도와 선택성을 향상시킵니다. 공정 중 언제든지 기울기 변경이나 밸브 전환과 같은 수동 작업을 수행할 수 있는 능력은 시료 회수에 매우 중요합니다. 오픈 액세스 소프트웨어를 통해 연구자 간에 장비를 공유할 수 있다면 비용 효율성이 향상될 수 있습니다.

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